技術(shù)原理與實(shí)驗(yàn)步驟

慢病毒感染是構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的常用技術(shù)，目前大部分所用的慢病毒包裝體系是基于人類免疫缺陷病毒（HIV-1）進(jìn)行改造的，一般包括表達(dá)質(zhì)粒及包裝質(zhì)粒，目的基因克隆到表達(dá)載體上后，與包裝質(zhì)粒共同用轉(zhuǎn)染試劑如PEI等轉(zhuǎn)染到293T細(xì)胞或293FT細(xì)胞中，對(duì)分裂期細(xì)胞及非分裂期細(xì)胞均具有很高的感染效率，病毒包裝滴度高、感染細(xì)胞效率高、外源基因表達(dá)效率高。